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簡(jiǎn)要描述：GC Lymphotec Inc.的iStock細(xì)胞凍存液不含血清和人以外的動(dòng)物來(lái)源成分，適用于人ES/iPS細(xì)胞和再生醫(yī)療研究。iStock可確保長(zhǎng)期穩(wěn)定性，使用本產(chǎn)品懸浮回收的細(xì)胞，可置于超低溫冷凍冰箱速凍并長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞也可冷凍后在-80°C下保存12小時(shí)，然后在液氮中儲(chǔ)存。
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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獲PMDA認(rèn)證
GC Lymphotec iStock細(xì)胞凍存液
GC Lymphotec Inc.的iStock細(xì)胞凍存液不含血清和人以外的動(dòng)物來(lái)源成分，適用于人ES/iPS細(xì)胞和再生醫(yī)療研究。
iStock可確保長(zhǎng)期穩(wěn)定性，使用本產(chǎn)品懸浮回收的細(xì)胞，可置于超低溫冷凍冰箱速凍并長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞也可冷凍后在-80°C下保存12小時(shí)，然后在液氮中儲(chǔ)存。
◆特點(diǎn)
● 無(wú)血清及其他動(dòng)物來(lái)源成分
● 無(wú)需程序化冷凍儀
● 可在-80°C快速冷凍且可長(zhǎng)期儲(chǔ)存
● 已取得PMDA認(rèn)證，可用于再生醫(yī)療產(chǎn)品原料
● 無(wú)需制備凍存液
● 冷藏保存的保質(zhì)期為3年
◆各凍存液與iStock的性能比較
人外周血單核細(xì)胞（PBMC） | 小鼠ES細(xì)胞 |
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從9名知情同意的健康者血液中，分離出外周血單核細(xì)胞（PBM C），在包被了OKT3抗體的培養(yǎng)瓶中，使用GC Lymphotec淋 巴細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)4天。使用含血清凍存液和iStock，將增殖的 細(xì)胞調(diào)整至1.5×107 cells/mL，采用慢速冷凍法，冷凍于-80℃。第二天，轉(zhuǎn)移至液氮罐中，保存7天后復(fù)蘇，比較回收率（復(fù)蘇 后細(xì)胞數(shù)/凍存前細(xì)胞數(shù)×100%）。 ?iStock和含血清凍存液顯示相同的復(fù)蘇率。 | 使用10% DMSO/Medium、iStock、競(jìng)品A、競(jìng)品B將增殖后的小鼠ES細(xì)胞調(diào)整濃度至4×106 cells/mL。分裝1 mL懸液至凍存管（n=4），不使用freezing container，在-80°C下進(jìn)行凍存。第二天轉(zhuǎn)移至液氮，儲(chǔ)存一周。 在37°C下快速?gòu)?fù)蘇，離心后，在培養(yǎng)基中懸浮并檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)，比較復(fù)蘇率。 ?與其他凍存液相比，iStock顯示更高的復(fù)蘇率。 |
人iPS細(xì)胞 | |
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冷凍3×106 cell/tube人iPS細(xì)胞（n=3），使用液氮儲(chǔ)存。 解凍后，接種至培養(yǎng)容器，3天后檢測(cè)細(xì)胞數(shù)。 ?與競(jìng)品相比，使用iStock凍存液的iPSC，復(fù)蘇后的增殖情況 ?更優(yōu)異。 | 使用1 mL凍存液懸浮3.0×106 cells的人iPS細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至凍存管，并使用-80°C的冷凍儀冷凍細(xì)胞（各凍存液分別冷凍3管），2天后轉(zhuǎn)移至液氮罐進(jìn)行保存。使用加熱至37°C的干浴器解凍液氮（液相）保存的冷凍細(xì)胞，然后懸浮于2 mL iPS細(xì)胞專用培養(yǎng)基，并使用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)法測(cè)量活細(xì)胞（每款凍存液各測(cè)量3管，計(jì)算平均值）。 |
使用加熱至37°C的干浴器復(fù)蘇各凍存液凍存的iPS細(xì)胞的冷凍管，然后懸浮于iPS細(xì)胞專用培養(yǎng)基并離心，通過(guò)去除上清，來(lái)去除凍存液。分散細(xì)胞沉淀，添加2 mL的iPS細(xì)胞培養(yǎng)專用培養(yǎng)基，并接種至層粘連蛋白預(yù)包被的6孔板的1個(gè)孔中，37°C、CO2濃度5%的條件下培養(yǎng)至第三天。培養(yǎng)結(jié)束后，使用細(xì)胞解離液解離細(xì)胞，并使用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)法測(cè)量活細(xì)胞（每款凍存液各測(cè)量3管，計(jì)算平均值）
細(xì)胞球（HEK293T）
實(shí)驗(yàn)概要 使用低吸附U底96孔板制備HEK293T細(xì)胞球，用競(jìng)品A、競(jìng)品B和iStock這3款凍存液在-80°C下冷凍儲(chǔ)存。冷凍2周后復(fù)蘇細(xì)胞，培養(yǎng)3天并評(píng)估增殖能力。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 使用WST-8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力后發(fā)現(xiàn)，與競(jìng)品A和競(jìng)品B凍存的細(xì)胞相比，iStock凍存的細(xì)胞吸光度的值更高。 以上結(jié)果顯示，iStock可有效用于HEK293T細(xì)胞球的凍存。 |
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◆iStock使用方法
1. 細(xì)胞凍存
?將細(xì)胞移至離心管。
?離心分離（800×g左右，3-5 min），用抽吸器去除上清。向~1.5×107個(gè)細(xì)胞中加入1 mL的 iStock，緩慢地進(jìn)行移液。
?將細(xì)胞懸液分注至冷凍管中。
?在-80℃的低溫冷凍箱進(jìn)行凍存（根據(jù)細(xì)胞類型，將冷凍管轉(zhuǎn)移至市售的冷凍容器進(jìn)行凍存）。
?第二天移至液氮罐中。
2. 細(xì)胞解凍
?在37°C的溫水浴中解凍冷凍管。
?立即與約10 mL的培養(yǎng)液混合。
?離心分離（800×g左右，3-5 min），用抽吸器去除上清。
?在適量的培養(yǎng)液中懸浮，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)容器，開(kāi)始培養(yǎng)。
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| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) | 備注 |
| 389-19454 | iStock iStock細(xì)胞凍存液 | 100 mL | - |
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