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簡要描述：用于免疫反應中協同刺激激活的高活性、高純度CD40L蛋白質。◆特點● 高活性MEGACD40L® 低聚物模擬體內膜輔助CD40L聚合和激活而無需增強劑● 高純度，低內毒素水平● 豐富的生產經驗保證產品批次間一致性和可靠性● 優化的配方以增強穩定性并提高活性
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個月 |
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重組人MEGACD40L® 蛋白（可溶）
用于免疫反應中協同刺激激活的高活性、高純度CD40L蛋白質。
◆特點
● 高活性MEGACD40L® 低聚物模擬體內膜輔助CD40L聚合和激活而無需增強劑
● 高純度，低內毒素水平
● 豐富的生產經驗保證產品批次間一致性和可靠性
● 優化的配方以增強穩定性并提高活性
MEGACD40L是一種高活性蛋白，是兩個三聚體CD40配體分子通過Adiponectin/ACRP30/AdipoQ的膠原域人工連接而成。在體內，這種蛋白質能有效的模擬CD40L的天然膜輔助聚合。可簡單有效的替代 [CD40L+增強劑]組合（產品編號：ALX-850-064）。
◆產品規格
別名 | CD40L:ACRP30headless, CD154:ACRP30headless, TNFSF 5:ACRP30headless, gp39:ACRP30headless |
分子量 | ~38 kDa |
來源 | CHO細胞表達。人CD40L（CD154）（aa 116-261）與小鼠ACRP30headless（aa 18-111）N端以及一個 FLAG® -tag融合。 |
UniProt ID | P29965 (human CD40L), Q60994 (mouse Adiponectin) |
濃度 | 復溶后0.1 mg/mL |
產品類型 | 凍干，含PBS |
純度 | ≥90%（SDS-PAGE） |
純化細節 | 多步層析純化 |
內毒素含量 | ≤0.01EU/μg 純化蛋白（LAL 測試；Cape Cod Associates） |
生物活性 | 與人CD40結合。B細胞激活（已證明存在CD86劑量依賴性上調） |
應用 | 可用于調節免疫和炎癥反應，作為mian疫治療的臨床前研究的一種蛋白質工具，用來監測病人接受hua療的過程 以及模擬自體免疫反應表型。 |
配制 | 用100 μL的無菌水溶解。以含5%胎牛血清的培養基進行進一步稀釋。 |
運輸 | 冰袋運輸 |
長期儲存 | -20℃ |
使用/穩定性 | 收貨后可穩定儲存在-20℃至少6個月 |
處理 | 避免反復凍融。復溶后，分裝成小份儲存于-20℃。 |
技術信息/產品說明 | FLAG是Sigma-Aldrich Co.的注冊商標。 |
◆應用實例
MEGACD40L® (產品編號：ALX-522-110)激活B淋巴細胞。方法：外周血單核細胞（PBMCs）37℃、5%CO2 在48孔板（1×106 細胞/孔）中培養48小時。每孔包含200 μL已梯度稀釋的MEGACD40L® 無血清測試培養基。處理后，清洗細胞，用小鼠anti-human CD19-PE和小鼠anti-humanCD86-APC進行雙重染色，然后用流式細胞術進行分析。所示數據為在不同的MEGACD40L® 濃度下，共染色為CD19+ 和CD86+ B細胞的百分數。
重組人MEGACD40L®（可溶）（產品編號：ALX-522-110）結構示意圖
PBMCs（外周血單核細胞）37℃、5%CO2 在48孔板（1×106細胞/孔）中培養48小時，每孔包含200 μL已梯度稀釋的MEGACD40L®（產品編號：ALX-522-110）無血清測試培養基、CD40L(產品編號：ALX-522-015)和CD40L+2 μg/mL 增強劑（產品編號：ALX-804-034）。處理后，用PBS+1%BSA清洗細胞3次。用小鼠anti-human CD19（PE偶聯）和小鼠anti-humanCD86（APC偶聯）進行雙重染色，4℃，2小時。用PBS+1%BSA清洗細胞3次，用PBS重懸。樣品用BD Facs Calibur 流式細胞分析儀進行分析。所示數據為在不同的濃度下CD86+B細胞百分數/CD19+B細胞百分數。
1000 ng/mL、7個連續批次的MEGACD40L® 用于B細胞激活實驗數據
通過在指定的溫度下儲存蛋白2個月來進行MEGACD40L® 穩定性測試。用B細胞激活實驗來進行蛋白活性測試。結果顯示在嚴苛的儲存條件下MEGACD40L® 仍能保持較好的活性。
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